TÉCNICAS DE EDICIÓN GENÓMICA EN SÍNDROME DE LOEFFLER

El tratamiento para las infecciones por nematodos se limitan a un pequeño número de medicamentos antihelmínticos, y la rápida expansión de la administración de fármacos,plantea preocupaciones sobre la resistencia al fármaco. CRISPR / Cas9 en filarias y otras especies de nematodos parásitos se puede usar para validar objetivos de drogas y vacunas, probar directamente los alelos que confieren resistencia antihelmíntica e incluso potencialmente para diseñar parásitos no patógenos para la protección contra una infección posterior o para su uso en helmintos.

Referencia Bibliográfica : 

Zamanian, M., & Andersen, E. C. (2016). Prospects and challenges of CRISPR/Cas genome editing for the study and control of neglected vector-borne nematode diseases. The FEBS Journal, 283(17), 32043221.doi:10.1111/febs.13781     https://sci-hub.tw/10.1111/febs.13781

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TERAPIA CELULAR PARA SÍNDROME DE LOEFFLER

El trasplante alogénico de células madre hematopoyéticas es un tratamiento curativo para pacientes con enfermedades hematológicas de alto riesgo. Sin embargo, la neumonitis intersticial (IP) y otras toxicidades siguen siendo las principales preocupaciones después de la irradiación total del cuerpo (TBI). A partir de células madres mesénquimas hematopoyéticas se logró disminuir este problema. Se utilizaron aceleradores lineales como alternativa a la terapia de cobalto-60 tradicional con técnica de protección pulmonar. Se administró TBI como Co-TBI y IM-TBI de los cuales los pacientes que fueron tratados con IM-TBI presentaron menos neumonitis intersticial.

Referencia Bibliografica :

Chiang, Y., Tsai, C.-H., Kuo, S.-H., Liu, C.-Y., Yao, M., Li, C.-C., … Chen, Y.-H. (2016). Reduced incidence of interstitial pneumonitis after allogeneic hematopoietic stem cell transplantation using a modified technique of total body irradiation. Scientific Reports, 6(1). doi:10.1038/srep36730

https://sci-hub.tw/10.1038/srep36730

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EJEMPLO DE TRANSGÉNICO ANIMAL EN SÍNDROME DE LOEFFLER

Los eosinófilos son importantes en la lucha contra parásitos como los helmintos, es su papel inflamatorio patógeno que tiene implicaciones significativas para la salud humana en el mundo desarrollado. Los ratones transgénicos que expresan de manera constitutiva la IL-5 (IL5T [IL-5 transgénica]: la IL-5 es producida por las células T, bajo el control del promotor CD2) tienen una eosinofilia extrema y permanente, donde los eosinófilos constituyen la mitad de todos los leucocitos. IL-5 actúa en múltiples niveles a lo largo del linaje de eosinófilos, regulando la producción, activación, migración y supervivencia de los eosinófilos.

Transgénicos

Ventajas 

1. Crear proteínas farmacéuticas, sobre todo anticuerpos destinados al tratamiento de infecciones o proteínas para elaborar vacunas contra virus y bacteriaspatógenas

2. Disminuir carencias o déficits nutricionales en ciertas poblaciones

3. Mejora de la calidad de los alimentos

4. Adaptación de órganos y células animales para humanos

5. Generación de modelos animales para estudios biomédicos

Desventajas 

1. Reacciones inmunitarias adversas causadas por vectores genéticamente transferidos al organismo humano

2. Se utilizan genes de resistencia a antibióticos lo que dificultaría el tratamiento de las enfermedades

3. La manipulación de los genes de un organismo altera las proteínas o cambia sus vías metabólicas

4. Alergias en los individuos que consuman el OMG

5. Pérdida de biodiversidad asociada al cultivo de transgénicos

Referencias Bibliográficas :

 1. Fairfax, K. A., Bolden, J. E., Robinson, A. J., Lucas, E. C., Baldwin, T. M., Ramsay, K. A., … de Graaf, C. A. Transcriptional profiling of eosinophil subsets in interleukin-5 transgenic mice. Journal of Leukocyte Biology . Publicado mayo  2018. Citado diciembre  2018. Disponible en: https://jlb.onlinelibrary.wiley.com/doi/full/10.1002/JLB.6MA1117-451R

2.Organización Mundial de la Salud. Frequently asked questions on genetically modified foods. Publicado mayo  2014. Citado diciembre  2018. Disponible en: http://www.who.int/foodsafety/areas_work/food-technology/Frequently_asked_questions_on_gm_foods.pdf

3.Houdebine, L.-M. (2014). Impacts of genetically modified animals on the ecosystem and human activities. Global Bioethics, 25(1), 3–18. doi:10.1080/11287462.2014.894709 https://sci-hub.tw/10.1080/11287462.2014.894709

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ADN RECOMBINANTE

ADN recombinante en la naturaleza

Un ejemplo de ADN recombinante en la naturaleza es la Recombinación genética. La recombinación genética es un proceso mediante el cual se obtiene un nuevo genotipo a través del intercambio de material genético entre secuencias homólogas de DNA, los cuales tienen orígenes diferentes. Mediante la recombinación genética la información genética de dos genotipos puede ser agrupada en un nuevo genotipo. Es así que la recombinación genética es una forma efectiva a través de la cual se mantiene e incluso aumenta la variabilidad genética de una población.

ADN recombinante artificial en Síndrome de Loeffler

Se basa en la actual vacuna bivalente Human Hookworm Vaccine en desarrollo clínico y en última instancia agregaría un antígeno larvario de Ascaris lumbricoides y un antígeno Trichuris trichiura en estadio adulto. La selección final de antígeno aplicará un sistema de clasificación que incluye la evaluación de los rendimientos de expresión y la solubilidad, la viabilidad del desarrollo del proceso y la ausencia de IgE específica de antígeno circulante entre las poblaciones que viven en regiones endémicas de helmintos.

1. Entrecruzamiento cromosómico. National Human Genome Research Institute. (Internet). Publicado 2017. Citado junio 2018. Disponible en: https://www.genome.gov/glossarys/index.cfm?id=41

2.http://www.scielo.org.co/pdf/iat/v29n2/v29n2a07.pdf

3.https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3934375/

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USO DE WESTERN BLOT EN SÍNDROME DE LOEFFLER

La infección por Ascaris lumbricoides es la geohelmintiasis de mayor importancia en zonas rurales, por su alta frecuencia y morbilidad. La infección estimula una respuesta de anticuerpos IgA, sin embargo se conoce poco sobre las proteínas responsables de la respuesta para este isotipo. La identificación de estas proteínas podría ayudar al diseño de pruebas para el diagnóstico y la detección en el medio ambiente o en individuos expuestos a este parásito. Nuestro trabajo se basó en identificar proteínas antigénicas en extractos y fracciones de A. lumbricoides para la respuesta especifica IgA en el suero de niños infectados.

Referencia Bibliográfica  : 

Cabrera Barroso José Leonardo, Jiménez Artigas Juan Carlos, Nuñez L, Pocaterra L, Rojas E, Hernán A. Evaluación inmunológica de extractos de Ascaris Lumbricoides para las inmunoglobulinas IgA en el suero de individuos infectados. Gen  [Internet]. 2014  Jun [citado  2018  Nov  19] ;  68( 2 ): 48-52. Disponible en: 

http://www.scielo.org.ve/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0016-35032014000200005

https://www.researchgate.net/publication/309527918_Production_of_IgA_antobodies_against_protein_components_of_eggs_from_Ascaris_lumbricoides_in_serum_of_infected_children

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PRUEBA DE PCR

Tema   : PCR cuantitativa y PCR digital para la detección de huevos de Áscaris Lumbricoides 

Objetivo: Desarrollar un método sensible para detección de huevos de Áscaris Lumbricoides mediante PCR cuantitativa en tiempo real (qPCR) y PCR digital (dPCR).

Muestra biológica: heces con huevos de áscaris lumbricoides

Tipo de ácido nucleico: ADN de Áscaris Lumbricoides

Gen a amplificar: ITS-1 (localizada entre los genes de ARNr 18S y 5.8S) , con un tamaño de 89bp

Tipo de PCR:    qPCR: 40 ciclos: Desnaturalización: 95ºC por 10 minuto.

                                                       Anillamiento: 60ºC por 40 segundos

                                                       Extención: 95 ºC por 10 segundos

                         dPCR: 40 ciclos:  Desnaturalización: 95ºC por 10 minutos

                                                      Anillamiento: 60ºC por 2 minutos

                                                      Extención: 72 ºC por 2 minutos

Especificidad y sensibilidad analítica: No presenta

Referencia Bibliográfica :

Acosta Soto, L., Santísima-Trinidad, A. B., Bornay-Llinares, F. J., Martín González, M., Pascual Valero, J. A., & Ros Muñoz, M. (2017). Quantitative PCR and Digital PCR for Detection of Ascaris lumbricoides Eggs in Reclaimed Water. BioMed Research International, 2017, 1–9. doi:10.1155/2017/7515409

https://sci-hub.se/10.1155/2017/7515409

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PRUEBA DE TAMIZAJE Y CONFIRMATORIA PARA SÍNDROME DE LOEFFLER

PRUEBA DE TAMIZAJE 

Los geohelmintos son considerados un problema de salud pública, siendo una causa importante de morbilidad y mortalidad; a nivel de América latina se estima que el 30% de la población padece de geohelmintiasis. Con una sensibilidad del 84% la prueba de ELISA podría ser sugerida como método de tamizaje; su especificidad se ve afectada por probables reacciones cruzadas por otros helmintos. La provincia de Los Ríos presenta mayor prevalencia de ascariasis seguido por la provincia del Guayas, los factores ambientales y sociales influyen en el desarrollo de este parásito intestinal en la zona. La eficacia encontrada en esta prueba permite ser implementada para diagnóstico confiable y precoz de ascariasis humana.

PRUEBAS CONFIRMATORIAS 

Evaluación de la reactividad serológica para IgA específica al extracto de huevos de A. lumbricoides por Western blot  , las proteínas separadas mediante electroforesis fueron transferidas a membranas de nitrocelulosa a 180 miliamperios a temperatura ambiente , bloqueadas con PBS-leche descremada al 1% durante 1 hora a temperatura ambiente. El perfil de proteínas del extracto de huevos de A. lumbricoides en geles de poliacrilamida mostró siete bandas visibles con movilidad relativa de 102, 92, 85, 65, 50, 45 y 30 kDa respectivamente. Se detectaron en el extracto de A. lumbricoides un mínimo de 17 proteínas.

Referencias Bibliográficas :

1.Champutiz E. Inmunodiagnóstico de ascariasis humana mediante ELISA indirecto [Internet]. 2016 [Citado 4 de noviembre del 2018]. Disponible en: https://www.researchgate.net/publication/310505120_Inmunodiagnostico_de_ascariasis_humana_mediante_ELISA_indirecto

2.Mayora S. Producción de anticuerpos IgA contra componentes proteicos del huevo de Ascaris lumbricoides en el suero de niños infectados [Internet]. 2016 [Citado 4 de noviembre del 2018]. Disponible en: http://www.scielo.org.ve/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1316-71382016000200003

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ALTERACIONES DE LA EPIGENÓMICA DEL SÍNDROME DE LOEFFLER

Áscaris lumbricoides es el parásito de lombriz intestinal más común y más grande del intestino humano, su prevalencia es superior en los países tropicales donde los climas cálidos y húmedos favorecen la transmisión durante todo el año. Por condiciones inherentes a la edad (juegos en la tierra, introducción de objetos en la boca, etc.) es mucho más frecuente en niños , la infestación se produce por ingestión de huevos presentes en suelos, agua  o alimentos contaminados, está relacionada con una higiene personal deficiente y condiciones sanitarias precarias.

Referencias Bibliográficas : 

1.- Jourdan, P. M., Lamberton, P. H. L., Fenwick, A., & Addiss, D. G. (2018). Soil-transmitted helminth infections. The Lancet, 391(10117), 252–265. doi:10.1016/s0140-6736(17)31930-x

https://sci-hub.tw/https://doi.org/10.1016/S0140-6736(17)31930-X
2.-Mayo Clinic .Ascariosis   .(Internet ). Actualizado Febrero 2018. Consultado 28 Octubre 2018. Disponible en : https://www.mayoclinic.org/es-es/diseases-conditions/ascariasis/symptoms-causes/syc-20369593

3.-Mota, K. C. P., Grama, D. F., Fava, N. M. N., Úngari, L. P., Faria, E. S. M., & Cury, M. C. (2018). Distribution and risk factors of Ascarididae and other geohelminths in the soil of Uberlandia, Minas Gerais, Brazil. Revista Do Instituto de Medicina Tropical de São Paulo, 60(0). doi:10.1590/s1678-9946201860017                                                                  

http://sci-hub.tw/http://dx.doi.org/10.1590/s1678-9946201860017

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ALTERACIONES DE LA TRADUCCIÓN EN SÍNDROME DE LOEFFLER (EOSINOFILIA PULMONAR )

Cuando un eosinófilo se encuentra con un parásito , se produce una serie de eventos, que incluyen una explosión respiratoria, la liberación de proteínas granulares, la generación de diversas citoquinas y la síntesis de cisteinil leucotrienos.En las neumonías eosinófilas, las proteínas granulares tales como la proteína básica básica mayor tipo 1 y tipo 2 (MBP1 y MBP2) es altamente tóxica para los helmintos actúa mediante la interrupción de la membrana celular y la actividad enzimática, la proteína catiónica eosinófila y otras proteasas provocan una exfoliación y lesión de las células epiteliales. 

Referencias Bibliográficas :

1.-Cheepsattayakorn, A., & Cheepsattayakorn, R. Neumonía Parasitaria y afectación pulmonar.PUBMED (Internet) .Publicado 9 de junio del 2014. Citado 21 de octubre 2018. Disponible en: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4068046/

2.- O'Connell, E. M., & Nutman, T. B. (2015). Eosinofilia en enfermedades infecciosas. Clínicas de inmunología y alergias de América del Norte, 35 (3), 493–522. doi: 10.1016 / j.iac.2015.05.003          https://sci-hub.tw/https://doi.org/10.1016/j.iac.2015.05.003

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ALTERACIONES DE LA TRANSCRIPCIÓN DEL SÍNDROME DE LOEFFLER

El síndrome de Löffler se ha relacionado clásicamente con el tránsito de organismos parásitos a través de los pulmones durante su ciclo de vida en el huésped humano .La proliferación de eosinófilos en la médula puede ser producida por alérgenos, parásitos, irritantes, infecciones, anticuerpos, drogas, entre otros desencadenantes. La maduración del eosinófilo tiene lugar en la médula ósea; un proceso que dura 8 días e implica a factores de transcripción (GATA-1, GATA-2 y c/EBP) y de crecimiento (interleucina 5 [IL-5], IL-13 y GM-CSF).

Referencias Bibliográficas : 

 1.- Nodal, E. M.-O., Molina Gutiérrez, M. Á., & Arias, M. M. (2013). Patología eosinofílica en la infancia. Anales de Pediatría Continuada, 11(1), 30–37. doi:10.1016/s1696-2818(13)70115-x https://sci-hub.tw/https://doi.org/10.1016/S1696-2818(13)70115-X

 2.- Allen, J., & Wert, M. (2018). Eosinophilic Pneumonias. The Journal of Allergy and Clinical Immunology: In Practice. doi:10.1016/j.jaip.2018.03.011

https://sci-hub.tw/https://doi.org/10.1016/j.jaip.2018.03.011

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ALTERACIONES EN LA GENÓMICA DEL SÍNDROME DE LOEFFLER

El nivel significativamente alto de concentración de  interleucina-5 ( IL-5 ) involucra a este en  la inmunopatogenia de la infección por Áscaris  lumbricoides , especialmente durante la fase de migración pulmonar. Se ha documentado que esta fase se asoció clínicamente con Ascaris Neumonitis por acumulación de eosinófilos preferentemente en el pulmón  y acompañada de infiltración celular, exudados serios, irritación bronquial y eosinofilia lo que se conoce como Síndrome de Loeffler. 

Para más información visite el siguiente link : https://sci-hub.tw/10.1016/S0304-5412(14)70866-2

Referencias Bibliográficas :
1.- Mora Cuesta, V. M., Agüero Balbín, R., Ciorba, C., Martínez Meñaca, A., & Espinoza Pérez, J. A. (2014). Síndromes eosinofílicos pulmonares. Medicine - Programa de Formación Médica Continuada Acreditado, 11(66), 3936–3948. doi:10.1016/s0304-5412(14)70866-2

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SINDROME DE LOEFFLER

El Síndrome de Loeffler (neumonía por áscaris ) es  una forma de enfermedad pulmonar eosinofílica  , en la cual los eosinofilos se acumulan en nuestro tejido pulmonar , esta se caracteriza por síntomas respiratorios leves como tos , disnea ,dolor torácico, entre otros ; su causa se debe por  infecciones parasitarias , principalmente por el Ascaris Lumbricoides , pero no en todos los pacientes se encuentra evidencia , para su diagnóstico es necesario realizar una radiografía de tórax  .

1.MedlinePlus.Eosinofilia pulmonar simple. (Internet) Acualizado agosto 2018. Consultado 28 de septiembre 2018. Disponible en : https://medlineplus.gov/spanish/ency/article/000105.htm

 2. ScienceDirect. (Internet) Actualizado noviembre 2014 . Consultado 28 de septiembre 2018 . Disponible en  :  https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0304541214708662

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BIENVENIDOS A MI BLOGGG !

Hola a tod@s: Bienvenidos a mi blog  de biología molecular, por medio de este espacio  voy a tratar temas vinculados con medicina, con el objetivo de informar a los lectores que estén interesados sobre diferentes enfermedades en especial la Neumonía , aquí podrán encontrar artículos de revistas científicas, noticias relacionadas con el tratamiento y diagnóstico de esta enfermedad, también videos educativos. Espero que la información ayude a profundizar y entender este tema  de interés para la sociedad. 

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