PRUEBA DE PCR

Tema   : PCR cuantitativa y PCR digital para la detección de huevos de Áscaris Lumbricoides 

Objetivo: Desarrollar un método sensible para detección de huevos de Áscaris Lumbricoides mediante PCR cuantitativa en tiempo real (qPCR) y PCR digital (dPCR).

Muestra biológica: heces con huevos de áscaris lumbricoides

Tipo de ácido nucleico: ADN de Áscaris Lumbricoides

Gen a amplificar: ITS-1 (localizada entre los genes de ARNr 18S y 5.8S) , con un tamaño de 89bp

Tipo de PCR:    qPCR: 40 ciclos: Desnaturalización: 95ºC por 10 minuto.

                                                       Anillamiento: 60ºC por 40 segundos

                                                       Extención: 95 ºC por 10 segundos

                         dPCR: 40 ciclos:  Desnaturalización: 95ºC por 10 minutos

                                                      Anillamiento: 60ºC por 2 minutos

                                                      Extención: 72 ºC por 2 minutos

Especificidad y sensibilidad analítica: No presenta

Referencia Bibliográfica :

Acosta Soto, L., Santísima-Trinidad, A. B., Bornay-Llinares, F. J., Martín González, M., Pascual Valero, J. A., & Ros Muñoz, M. (2017). Quantitative PCR and Digital PCR for Detection of Ascaris lumbricoides Eggs in Reclaimed Water. BioMed Research International, 2017, 1–9. doi:10.1155/2017/7515409

https://sci-hub.se/10.1155/2017/7515409